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药品/生物制品生产用细胞质量控制关键技术研究与应用

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本成果包括三项创新性技术、两类实验规程和一套技术体系。

  一、创新性成果 

1. 建立先进的多重荧光标记全自动基因组扫描技术 该技术实现了细胞基因组中STR的不同基因座同步检测,检测位点增加到21个,效率提高1倍,准确率达99%。构建了首个21个位点的STR对比数据库,比国际最知名的美国ATCC、德国DSMZ的STR数据库中的数据(9个位点) 多12个位点。其中45株细胞STR数据是中国特有,数据库公众开放,免费使用(www.CCTCC.ORG)。 

2. 研制一套独特的细胞同工酶检测系统 该系统突破了苹果酸脱氢酶(MD)难以检测的瓶颈,检出率达98%,使检测酶类达到4种,与国际公认的同类技术相比,检测效率提高35%,检测灵敏度显著增加。 

3.建立高效的多重实时荧光定量PCR病毒污染检测技术 在一个反应体系中加入多对引物和多条探针,将多个单一PCR检测合在一个管中进行,可在一次反应中同时检测3-4种病毒,精度达到5-50个基因拷贝/反应,提高检测效率50%以上。 

4. 编制并验证了国内首部细胞质量控制操作规程 包括8项细胞质控实验操作技术规范和21项规程;精选了12株检定用的对照细胞系;设计并验证了包括细胞身份识別鉴定、细胞交叉污染检测和细胞外源病原体污染检查三类共11项核心技术。本成果包括三项创新性技术、两类实验规程和一套技术体系。



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