本发明涉及电喷法固定酶-层状硅酸盐改性纳米纤维复合膜的制备方法。所述溶菌酶-累托石/纤维素纳米复合薄膜材料的制备方法，是先利用静电纺丝技术制备得到醋酸纤维素纳米纤维膜，再利用电喷技术将溶菌酶和累托石的混合溶液固定在纳米纤维膜的表面，从而制得的溶菌酶-累托石/纤维素纳米复合薄膜材料，溶菌酶和累托石的混合溶液中溶菌酶与累托石的质量比为2.5~10：1。所制备溶菌酶-累托石/纤维素纳米复合薄膜材料可以作为抗菌材料应用，广泛应用在农业、卫生、食品以及生物医用材料等领域。